EURx (clonaggio) - Strumentazione per laboratorio

Kit universale di estrazione del DNA genomico

• Metodo basato sulla precipitazione con etanolo di acidi nucleici ottenuti da cellule o tessuti lisati con reagente GeDI. •
Il reagente GeDI è una soluzione monofasica senza solventi organici
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Il DNA purificato può essere utilizzato per applicazioni di routine come PCR, clonaggio, RFLP, Southern blotting, ecc. •
Contenuto: reagente GeDI per l'isolamento del DNA totale da vari tipi di campioni, tampone di risospensione di ResSol, colonne centrifughe con membrana di silice
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Quantitativi di campione applicabili: 50 mg di tessuto animale, 50-200 mg di tessuto vegetale, 107 cellule animali, batteri o lieviti
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Resa variabile a seconda del tipo di campione: da 5 a 50 µg per 10 mg di tessuto animale, da 10 a 100 µg per 500 mg di foglia, da 4 a 7 µg per 106 cellule di mammifero, da 30 a 40 µg per 109 cellule batteriche
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Disponibile in 25 preparati e 100 preparati
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Il reagente GeDI esiste anche in versione stand alone

Reagente di stabilizzazione dell'RNA dell'RNA fisso

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• Reagente per stabilizzazione e protezione rapida per campioni freschi e non congelati (tessuti, leucociti, coltura cellulare o coltura batterica)
• Mantiene gli RNA fino a 7 giorni a temperatura ambiente e fino a 4 settimane a 4-8 ° C, conservazione per periodi più lunghi a -20 ° C o -80 ° C
• 10 volumi di reagente per volume di campione, o 10 µl per mg di campione

RNA Extracol

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• Reagente di estrazione dell'RNA totale da vari campioni (tessuti animali e umani, piante, cellule, lieviti e batteri)
• Composto da fenolo e tiocianato di guanidinio
• Protocollo semplice, estrazione dell'RNA in un'ora
• Alto rendimento
• Regolabile alla quantità di materiale
• Richiede l'aggiunta di cloroformio, isopropanolo, etanolo e acqua di grado biologia molecolare

Endonucleasi di restrizione

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La maggior parte degli enzimi di restrizione prodotti da EURx funzionano in un tampone ONE BUFFER e possono essere utilizzati per la doppia digestione.
ONE BUFFER 10X buffer di reazione viene fornito con l'enzima.

T4 DNA Ligase

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• Catalizza la formazione di un legame fosfodiestere tra le estremità 5'-P e 3'-OH di nucleotidi di DNA o RNA a doppio filamento
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Catalizza la legatura di 2 frammenti di DNA a doppio filamento con estremità diritte
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Catalizza la legatura di frammenti di DNA con estremità coesive complementari
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Aiuta a sigillare rotture a filamento singolo in duplex di DNA, RNA o DNA ibrido / RNA
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Adatto per clonare frammenti digeriti di di-restrizione per la legatura di linker o adattatori per DNA a punta smussata
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Disponibile nei formati 20000 e 100000 unità *
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* Unità finale coesiva - 200 UEC = 3 unità Weiss

Fosfatasi alcalina (CIP)

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• Catalizza l'idrolisi dei monoesteri fosfatici
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Utilizzabile per rimuovere l'estremità 5'-P di DNA o RNA prima di etichettarli in 5 ' •
Utilizzato per rimuovere 5'-P di vettori linearizzati per impedire che la loro ricircolazione " a vuoto" durante i processi di clonaggio
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Compatibile con la defosforilazione delle proteine
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Disponibile in 1000 e 5000 unità

Polinucleotide chinasi T4 (PNK)

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• Catalizza la fosforilazione dell'estremità 5'-OH delle molecole di DNA o RNA a doppio filamento a singolo filamento
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Catalizza il trasferimento del fosfato-γ di molecola ATP sull'estremità 5'-OH dell'acido nucleico
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Utilizzato per linker, adattatori e frammenti di acido nucleico fosforilati prima della legatura
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Utilizzabile per etichettatura di 5' degli acidi nucleici prima del sequenziamento
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Contiene un'attività secondaria 3'-fosfatasi
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Disponibile in 1000 e 5000 unità

PfuPlus! DNA Polimerasi

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• Miscela di DNA polimerasi Pfu (Pyrococcus furiosus) e attivatore di polimerizzazione termostabile
• Polimerasi ricombinante ultra pura, termostabile e revisionabile
• Formulazione progettata per sintetizzare sequenze di DNA fino a 20 kb
• Fedeltà più di 10 volte superiore a un Taq standard
• Consigliato per PCR ad alta fedeltà, sequenze ricche di GC o con strutture secondarie problematiche, mutagenesi sito-diretta e clonaggio di estremità smussata
• Può essere utilizzato anche per la PCR classica e l'estensione del primer ad alta temperatura
• Fornito con tampone di reazione 10X
• Disponibile in 100, 500 e 2500 unità
• OnPfuPlus! ADN polymérase: version hot start, stable a température ambiante, activation en 10 min a 90 °C

Exo-BAP Mix

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• Miscela utilizzata per pulire i prodotti della PCR mediante azione enzimatica prima del sequenziamento o dell'analisi SNP
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Permette il degrado di dNTP che non vengono utilizzati durante la PCR e sempre presenti nella miscela di reazione
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Contiene fosfatasi alcalina batterica (BAP) sensibile al calore ed esonucleasi I in un tampone appositamente formulato
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Disponibile in 100 reazioni e 500 reazioni

Fosfatasi alcalina batterica (BAP) sensibile al calore

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• Molto adatto per le tecniche di immunodetection nella diagnosi e nell'immunolabel delle proteine e degli acidi nucleici trasferiti alle membrane
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Catalisi del rilascio dei gruppi 5'-P e 3'-P di molecole di DNA, RNA e di nucleotidi
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Sopprime le molecole 5'-P di DNA, RNA, di rNTP e dNTP
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Utilizzato per rimuovere 5'-P le estremità linearizzate per impedire che la loro ricircolazione sia "a vuoto" durante i processi di clonaggio
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Resistente ai cambiamenti chimici e attivo in un'ampia varietà di tamponi di reazione
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Inattivabile a caldo per 5 minuti a 70 ° C
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Compatibile con la defosforilazione delle proteine
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Disponibile in 1000 e 5000 unità

Exonuclease I

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• Catalizza l'eliminazione dei nucleotidi dal DNA a singolo filamento nella direzione 3 '-> 5'
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Non degrada il doppio filamento di DNA o RNA
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Ideale per la degradazione di primer a filamento singolo dopo PCR prima del sequenziamento del DNA o dell'analisi SNP
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Utilizzato per la degradazione del DNA a singolo filamento in una preparazione di DNA a doppio filamento
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Attivo in un'ampia varietà di buffer di reazione
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Disponibile in 4000 e 20000 unità

DNasi I (RNasi-free)

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• Endonucleasi non-specificatamente degradanti a singolo filamento a doppio filamento di DNA rilasciando di- tri-oligonucleotidi di fosforilati in 5'
• Utilizzato per rimuovere il DNA contaminante durante le preparazioni di RNA prima delle applicazioni RT-PCR e RT-qPCR
• Da utilizzare anche per rimuovere la matrice del DNA dal mezzo di reazione dopo una trascrizione in vitro
• Disponibile in 1000 e 5000 unità

RNasi A (DNasi-free)

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• Endoribonucleasi pirimidiniche specifiche che degradano l'RNA a singolo filamento
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Catalizza la scissione del legame fosfodiestere tra una pirimidina e il seguente nucleotide
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Utilizzato per la delezione di RNA nelle preparazioni di DNA
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Disponibile nel formato 10 e 50 mg

T7 endonucleasi I

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• Struttura dipendente dall'enzima che riconosce la scissione di DNA non corrispondente, DNA eteroduplex, strutture di DNA ramificate, giunzioni di Holliday e intaccature nel DNA
• La scissione avviene a livello del primo, secondo o terzo legame fosfodiesterico a 5 'del disadattamento
• Enzima ricombinante ultrapuro

Possibili applicazioni:
• Riconoscimento dei disallineamenti del DNA, in particolare nel contesto dell'editing del genoma con il metodo Crispr
• Risoluzione della giunzione del DNA con 4 rami
• Rilevazione o scissione del DNA eteroduplex e intaccature nel DNA
• Disponibile in 250 e 1250 unità