Inserti per coltura cellulare e piastre compatibili: come studiare barriere, co-colture e trasporti cellulari?

Essenziali per modellare le interfacce biologiche, gli inserti per colture cellulari separano due compartimenti consentendo gli scambi attraverso una membrana microporosa. Agevolano la co-coltura, saggi di permeabilità, studi di migrazione/invasione e la coltura all’interfaccia aria-liquido. Disponibili nei formati a 6, 12, 24 o 96 pozzetti e in versioni per piastra da 100 mm, si adattano alle piastre standard SBS e ai flussi di lavoro di imaging, TEER e automazione. Dutscher seleziona supporti sterili, trattati TC o pre-rivestiti ECM, per risultati riproducibili e confrontabili tra laboratori.

Quali sono i diversi tipi di inserti per colture cellulari e come sceglierli?

Un inserto combina un telaio con una membrana porosa (PET, PC, PTFE). I formati a 6, 12 e 24 pozzetti offrono ampia area di crescita per barriere epiteliali o endoteliali. Gli inserti a 96 pozzetti, nel formato SBS, privilegiano il cribraggio ad alto throughput. Gli inserti per piastra da 100 mm massimizzano la superficie per ALI e l’ingegneria tissutale.

Per la membrana: il PET (poliestere) è otticamente trasparente e adatto all’imaging; il PC offre pori ben definiti per test di permeabilità; il PTFE, idrofobo, è ideale per l’interfaccia aria-liquido e spesso richiede una pre-bagnatura. I diametri di poro tipici (0,4 µm per il trasporto di soluti, 3 µm per la trasmigrazione, 8 µm per l’invasione) guidano la scelta in base all’applicazione. Superfici trattate per coltura cellulare (TC-treated) o pre-rivestite con ECM (collagene, fibronectina) garantiscono adesione e differenziazione.

Criteri chiave: formato (6/12/24/96 pozzetti o 100 mm), materiale e trasparenza ottica, dimensione/densità dei pori, area di crescita, compatibilità TEER (elettrodi “chopstick”), volumi apicale/basolaterale, confezionamento sterile (singolo/in vassoio), compatibilità con l’automazione e coperchi anti-evaporazione.

Tipo di inserto	Principio	Applicazioni
6/12/24 pozzetti	Supporto sospeso, membrana PET/PC	Barriere epiteliali, co-coltura, TEER
96 pozzetti (HTS)	Micro-inserti in formato SBS	Screening di permeabilità, ADME, tossicologia
Piastra da 100 mm	Ampio diametro, ALI ottimizzata	Epitelio respiratorio, tessuti 3D

Dutscher propone: inserti di coltura a 6, 12, 24 e 96 pozzetti, inserti per piastre da 100 mm e piastre 12/24/96 pozzetti compatibili, per costruire un sistema coerente e affidabile.

In quali applicazioni vengono utilizzati gli inserti per colture cellulari?

• Scienze della vita/Accademia : modelli di barriera (intestino Caco-2, BBB, rene, pelle), co-colture apicale/basolaterale, ALI respiratorio.
• Farmaceutico/ADME : permeabilità (Papp), trasportatori, interazione farmaco-barriera, screening in 96 pozzetti.
• Cosmetico : irritazione, penetrazione cutanea, modelli epiteliali differenziati.
• Agroalimentare : biodisponibilità di nutraceutici, interazione microbiota-epitelio in co-coltura.
• Ambiente : ecotossicologia, esposizione ad aerosol in ALI.
• Chimica/Materiali : diffusione, compatibilità formulazione/barriere.
• Controllo qualità : lotti di rivestimenti, stabilità delle prestazioni (TEER, confluenza).

I diversi tipi di inserti per colture cellulari e piastre di coltura disponibili

Domande frequenti sugli inserti per colture cellulari

Quale dimensione dei pori scegliere?
0,4 ?m per soluti e giunzioni strette; 3 ?m per transmigrazione; 8 ?m per invasione. Adattare al tipo cellulare e al meccanismo di interesse.

PET, PC o PTFE: quali differenze?
PET trasparente per imaging, PC a pori calibrati per misure fini, PTFE idrofobo per colture ALI. La scelta dipende da trasparenza, bagnabilità e applicazione.

Si può riutilizzare un insert?
Non raccomandato: rischio di contaminazione e alterazione della membrana. Gli inserti sono a uso singolo per garantire la riproducibilità.

Gli inserti sono compatibili con TEER?
Sì, se altezza del pozzetto e accesso agli elettrodi lo consentono. Preferire membrane adatte e coperchi che limitano l’evaporazione per stabilizzare le letture.

Occorre pre-bagnare la membrana?
Per il PTFE sì: pre-bagnare con alcool e poi risciacquare con PBS. PET/PC trattati TC si bagnano con mezzo; evitare bolle sotto la membrana.

Inserti a 96 pozzetti: quali vantaggi?
Alto throughput, formato SBS, volumi ridotti. Ideali per ADME/tossicologia; verificare la compatibilità con automazione e lettori di piastre.

Piastre riceventi: hanno un impatto?
Sì, geometria e trattamento superficiale influenzano volumi basolaterali, evaporazione e TEER. Usare piastre a 12/24/96 pozzetti appropriate.